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Lactate-Glo™ Assay

Part Numbers: J5021, J5022

J5021_Lactate-Glo Assay-5ml_3
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様々な生物学的サンプルより迅速、高感度に乳酸を測定

  • ハイスループットなワークフローでも実施可能
  • 他の代謝産物アッセイや細胞生存試験とのマルチアッセイも可能
  • 最大 200µM までの直線性

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選択製品のカタログ番号: J5021

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Lactate-Glo™ Assay
5ml
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様々なサンプルより高感度、迅速に乳酸を検出

Lactate-Glo™ Assay は生物学的サンプルより迅速、選択的、高感度にL- 乳酸を検出する発光アッセイです。乳酸はグルコース恒常性やエネルギー生産に応答する主要な代謝経路である解糖系により生成されます。これまで単なる解糖系の副産物であると考えられてきましたが、現在はがんの発生、糖尿病およびその他の疾患に関わる中間代謝の重要な調節分子であると考えられています。

測定原理

The Lactate-Glo™ Assay は乳酸の酸化とそれにより生成される NADH を発光 NADH 検出システムで測定します。乳酸脱水素酵素が乳酸とNAD+を用いてピルビン酸と NADHを産生します。この NADH 存在下でルシフェリン前駆体基質はレダクターゼによりルシフェリンに変換され Ultra-Glo™ Recombinant Luciferase の基質となり発光します。Lactate-Glo™ Assay には、哺乳動物細胞にみられる主要な立体異性体 L-乳酸に対する特異性を持つ L-乳酸選択性乳酸脱水素酵素が含まれます。

乳酸脱水素酵素  (LDH)、NAD+、レダクターゼ、レダクターゼ基質およびルシフェラーゼを含む Lactate Detection Reagent を乳酸を含むサンプルに等量加えると酵素カップリング反応が同時に起こります。発光シグナルはサンプルに含まれる乳酸量に比例し、すべての乳酸が消費されるまで増加し、それから発光シグナルは安定します。


ご希望の処理量とワークフローに適応します！

The Lactate-Glo™ Assay は柔軟性の高いシステムで、ハイスループットフォーマット (6) も可能で、多くのサンプル種にも対応します（リニアレンジにフィットさせるために希釈などの前処理が必要な場合もあります）。また、内在性の酵素活性の不活化、除タンパク質および NAD(P)H 分解などが必要な場合もありますが、これらの処理を簡便に行う96- および 384 ウェルプレートに対応した方法を提供しており、サンプルの遠心やスピンカラムも使用しません。

 

発光シグナルはサンプル中の乳酸量と比例

13887ma-w: Luminescence from lactate assay proportional to metabolite.
Lactate titration curve. Serial dilutions of lactate were prepared as described in TM493, and lactate detected using the Lactate-Glo™ Assay.

A549 細胞による乳酸の分泌

13888ma-w: Luminescent lactate assay measured secretion for 72 hours.
A549 cells were plated at 5,000 (light blue bars) and 15,000 (dark blue bars) cells/well as described in TM493. Red line represents the luminescence of medium-only controls. Samples were taken from the medium at times indicated and the amount of lactate measured using the Lactate-Glo™ Assay. 

利点

様々なサンプル種より迅速に代謝物を測定: 培地、細胞、組織および血漿より測定可能。最小限のサンプル調製ステップだけで、遠心やスピンカラムは不要

細胞内の乳酸検出はウェル内で簡便に調製

広いダイナミックレンジ: 3桁までの直線性を有しているのでサンプル測定が容易

わずかな変化でも検出: S/Bmax > 200 のアッセイウインドウを持つので発色法や蛍光法によるアッセイよりもわずかな代謝物レベルの変化を検出

サンプルあたりの情報量を最大限に: 同じサンプルより複数の代謝物を測定でき、細胞生存性試験とのマルチアッセイで補正することも可能

1つのサンプルより複数の代謝産物を測定 !

細胞内のエネルギー状態で重要な4種類の代謝産物 — グルコース、乳酸、グルタミン酸およびグルタミンを発光アッセイ Glucose-Glo™、Lactate-Glo™、 Glutamine/Glutamate-Glo™ および Glutamate-Glo™ Assay で同時並行で測定することができます。 これら4種の発光アッセイすべてにサンプル処理が対応するため4種すべての代謝物を同一サンプルより検出することができます。これらのサンプル種には培地、血漿、血清および組織などが含まれます。以下のデータは Technical Manual TM494 に従い、同じ培養細胞より取得した培地サンプルを用いて代謝産物を測定したものです。

13836ma-w-a: Glucose consumption measured in metabolite multiplex assay.
13836ma-w-b: Lactate secretion measured in metabolite multiplex assay.
13836ma-w-c: Glutamine consumption measured in metabolite multiplex assay.
13836ma-w-d: Glutamate secretion measured in metabolite multiplex assay.

FAQs

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プロトコール

Complete Protocol

製品仕様

You are viewing: J5021 Change Configuration

選択製品の構成品内容

Item Part # Size Concentration

Reductase

 G884A 1 × 55μl 6mg/ml

Reductase Substrate

 G885A 1 × 55μl

Luciferin Detection Solution

 J135A 1 × 5ml

NAD

 J136A 1 × 30μl

Lactate

 J137A 1 × 50μl

Lactate Dehydrogenase

 J195A 1 × 1 each

SDS

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分析証明書

Search by lot number

使用制限

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

保存条件

AA

パテントおよび免責条項

U.S. Pat. Nos. 9,273,343 and 9,951,372, European Pat. No. 2751089, Japanese Pat. No. 6067019 and other patents pending.

製品仕様

You are viewing: J5022 Change Configuration

選択製品の構成品内容

Item Part # Size Concentration

Reductase

 G884B 1 × 275μl 6mg/ml

Reductase Substrate

 G885B 1 × 275μl

Luciferin Detection Solution

 J135B 1 × 50ml

NAD

 J136B 1 × 275μl

Lactate

 J137A 1 × 50μl

Lactate Dehydrogenase

 J195A 1 × 1 each

SDS

Search for SDS

分析証明書

Search by lot number

使用制限

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

保存条件

AA

パテントおよび免責条項

U.S. Pat. Nos. 9,273,343 and 9,951,372, European Pat. No. 2751089, Japanese Pat. No. 6067019 and other patents pending.

技術資料

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